張經理
當前位置:西安百螢生物科技有限公司>>trFluor™ 染料和試劑盒>>細胞增殖與活性檢測試劑盒>> 22768Cell Meter 比色法MTT細胞增殖檢測試劑盒
Cell Meter 檢測試劑盒是一套用于檢測細胞活力的工具。 Cell Meter 比色法MTT細胞增殖檢測試劑盒使用MTT(3-(4,5-二甲基噻唑-2-基)-2,5-二苯基四氮唑溴化物)定量活細胞的數量。水溶性MTT在代謝活性細胞中產生水不溶性紫色甲瓚。產生的甲瓚的數量與活細胞的數量成正比。在560 nm附近測得吸光度增加。與其他需要繁瑣的增溶步驟來溶解不溶于水的甲瓚產物的其他商業MTT測定法不同,Cell Meter 比色MTT細胞增殖試劑盒只需很少的人工操作。我們專有的配方去除了費時的增溶步驟。它是確定細胞增殖和細胞毒性測定中活細胞數量的強大的MTT試驗。檢測靈敏度比傳統的MTT分析高10倍。百螢生物為您提供優質的 Cell Meter 比色法MTT細胞增殖檢測試劑盒。
樣品分析方案
概述
在96孔板中制備細胞(100 µL /孔)
添加MTT工作溶液(140 µL /孔)
在37°C下孵育2-4小時
讀取560 nm處的吸光度
注:使用前,請在室溫下解凍所有試劑盒組分。
工作溶液制備:
通過將4 mL MTT試劑A(組分A)與10 mL MTT試劑B(組分B)(2:5,MTT試劑A:B的體積比)混合,制備所需的MTT工作溶液量,混勻。
注意:14 mL MTT工作溶液足以在96孔板上進行100次測試。實驗前準備足夠的MTT工作溶液,并及時使用。
操作步驟
1.在具有透明底的組織培養孔板中,培養1000至40,000個細胞/孔。
2.將測試化合物添加到細胞中,并在37°C,5%CO2培養箱中孵育所需的時間(例如24、48或96小時)。3.對于空白孔(不含細胞的培養基),添加相同量的測試化合物。對于96孔板,建議的總體積為100 µL,對于384孔板,建議的總體積為25 µL。
注意:應對每個細胞系進行單獨評估,以確定增殖或誘導細胞毒性的細胞密度。對于增殖測定,使用較少的細胞;對于細胞毒性測定,請使用更多的細胞作為開始。
4.向每個孔中加入140 µL /孔(96孔板)或35 µL /孔(384孔板)。
5.在37°C下孵育平板2-4小時,避光。
注意:根據不同的細胞類型和使用的細胞濃度,孵育時間可能從2小時到過夜。優化每個實驗的孵育時間。
用吸光度板讀數器在OD = 562 nm處檢測吸光度。
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