以下程序適用于大多數細胞類型。生長培養基，細胞密度，其他細胞類型的存在和其他因素可能影響染色。玻璃器皿上的殘留洗滌劑也可能影響許多生物的真實或明顯染色，導致在有或沒有細胞存在的溶液中出現明亮染色的物質。

1）制備1-10mM DMSO儲備溶液。如果儲存在-20°C，DMSO儲備液可以保存6個月。

2）使用適合您樣品的固定方案。

3）通過離心沉淀細胞，并將細胞重懸于緩沖鹽溶液或培養基中，在pH 7.4下進行佳染料染色。培養物中的貼壁細胞可以在蓋玻片上或細胞培養孔中原位染色。

4）使用1和10μM之間的濃度添加AO染色并孵育15至60分鐘作為指導。

注意：在初的實驗中，好在整個建議的范圍內嘗試幾種染料濃度，以確定產生佳染色的濃度。