上海邦景實業有限公司
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更新時間:2023-09-19 09:41:49瀏覽次數:159
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商品屬性:
產品名稱:大鼠氣管軟骨細胞
貨號:BJ-X97719
規格:5×10?Cells/T25培養瓶
分類:原代細胞
商品介紹:
名稱 大鼠氣管軟骨細胞 3生長特性 貼壁 細胞形態 梭形、多角形 方法簡介 公司實驗室分離的大鼠氣管軟骨細胞采用中性-膠原酶聯合消化法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。 推薦傳代次數 可傳5代左右;3代以內狀態佳 推薦換液頻率 每3-4天換液一次 |
細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:產品僅用于科研
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
點頭根霉 蕁麻青霉
鼠傷 假單胞桿菌
雙孢蘑菇(白蘑菇、洋蘑菇) 冰核細菌
威爾酵母 長根菇(長根奧德磨)
葉柄粘球菌 皂味口磨
大鼠WAP四二硫化物核心域蛋白1(WFDC1)elisa檢測試劑盒
大鼠V-Rel網狀內皮增生病毒癌基因同源物A(RELA)elisa檢測試劑盒
大鼠V-Myc骨髓細胞瘤病毒癌基因同源物(MYC)elisa檢測試劑盒
大鼠V-Jun肉瘤病毒癌基因同源物(JUN)elisa檢測試劑盒
大鼠V-Fos-FBJ骨肉瘤病毒癌基因同源物(FOS)elisa檢測試劑盒
大鼠氣管軟骨細胞大鼠胰α2A(AMY2A)elisa檢測試劑盒免費代測
大鼠胰淀素(Amylin)elisa檢測試劑盒
大鼠胰淀素(IAPP)elisa檢測試劑盒
大鼠胰多肽 elisa檢測試劑盒
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操作要點:
1)將培養基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養基。
2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內,再逐步轉移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內*解凍,使細胞能盡快通過最易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內,將管內細胞轉移至準備好的離心管內,輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次,均轉移至離心管內。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養基,吹打制成細胞懸液。
5)將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內,補加適量的培養基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內培養。
6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養,待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。