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L1210白血病細胞

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更新時間:2016-07-08 22:46:04瀏覽次數:465次

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L1210白血病細胞上海谷研科技有限公司的原代細胞株及血清,ATCC細胞株、hyclone澳洲特級胎牛血清,優等胎牛血清,標準胎牛血清,gibco特優級胎牛血清血清,新生牛血清。
細胞術檢測樣品制備方法
直接標記抗體(FITC標記抗體)L1210白血病細胞
(1) 收集1×106個細胞,800rpm離心5min,4℃以上冷PBS洗一次。
(2) 用4%多聚甲醛1ml室溫固定40分鐘,800rpm離心5min去上清。加2ml PBS重懸洗滌細胞,800rpm離心5min。
(3) 用1ml含5% 人血清的 PBS 重懸細胞,冰上孵育10min,800rpm離心5min去上清。加入200ul含0.5%BSA 和飽和劑量的熒光標記抗體(5×105個細胞/20ul抗體)的PBS ,避光冰上放置30min,離心棄上清。加入200ul 1% 多聚甲醛固定,待測即可。
(4) 用流式細胞儀檢測熒光值,每管計數10 000個細胞。[2]
未標記抗體間接免疫熒光標記法:
(1)收集2×106個細胞,用冷的PBS 2ml 洗滌細胞一次,800rpm離心5min。
(2)用2ml 4%多聚甲醛室溫固定細胞40min,800rpm離心5min;2ml PBS重懸細胞,800rpm離心5min;
(3)用1ml含0.2%Triton-X100和5%血清的PBS重懸細胞,冰上放置10min,800rpm離心5min。
(4)加入飽和劑量未標記抗體,冰上放置40min,800rpm離心5min,用2ml冷的PBS 重懸細胞,800rpm離心5min,洗去未結合一抗,重復一次。
(5)加入熒光標記(FITC)標記的二抗,冰上避光放置40min后,800rpm離心5min,去上清,PBS洗滌兩次。
(6)加入0.5ml 1%多聚甲醛重懸細胞;固定待測。
(7)流式細胞儀檢測熒光值,每管計數10 000個細胞。
細胞周期、細胞凋亡及DNA倍體分析樣品(PI染色)的制備:
(1)待測樣本制成單細胞懸液,然后200g離心5分鐘,棄上清。
(2)用4℃預冷的70%冷乙醇固定,4℃保存 ,至少固定18小時。
(3)調整細胞濃度為106細胞/毫升,取1毫升細胞懸液,用PBS洗三次,細胞重懸于1毫升PI染液中,37℃孵育30分鐘即可進行流式分析。
(4)PI染液終濃度為50微克/毫升,RNase A終濃度為20微克/毫升。

其他*產品:
TriazoloMethylindole-3-acetic acid 三唑甲基吲哚-3-乙酸 177270-91-6
Quinotolast 喹托司特 101193-40-2
Quinoxaline-6-sulfonyl chloride 喹喔啉-6-磺酰氯 692737-70-5
PigMent Yellow 93 顏料黃 93 5580-57-4
Pilsicainide hydrochloride 鹽酸吡西卡呢 88069-49-2
piMagedine 氨基胍媒染劑 79-17-4
PlatinuM nitrate 硝酸鉑 18496-40-7
POLY(3,4-ETHYLENEDIOXYTHIOPHENE)-POLY(STYRENESULFONATE) 聚(3,4-亞乙二氧基噻吩)-聚(苯乙烯磺酸) 155090-83-8
Poly(4-vinylpyridine) 聚4-乙烯吡啶 9017-40-7
PolyacrylaMide solution 聚丙烯酰胺 9003/5/8
Poly(acrylaMide-co-acrylic acid) partial sodiuM salt 聚丙烯酰胺 62649-23-4
Poly(acrylaMide-co-acrylic acid) 聚丙烯酸-丙烯酰胺 9003/6/9
Poly(allylaMine hydroChloride) 聚(烯丙胺·鹽酸) 71550-12-4
poly(chlorotrifluoroethylene) 聚三氟氯乙烯 9002-83-9
Polylactic acid 聚乳酸 26023-30-3
POLY(DICHLOROPHOSPHAZENE)  26085-02-9
poly(diMethylsiloxane) 硬脂基聚二甲硅氧烷 67762-83-8
sMaller size 三乙氧基封端的聚乙基氫硅氧烷 24979-95-1
poly(ethylene terephthalate) 高粘聚對苯二甲酸乙二醇酯樹脂(HVPET-94) 25038-59-9
soMe 聚丙烯 9003-07-0
細胞凍存
1.將細胞消化下來,移入離心管離心,棄上清
2.準備凍存液比例:50%FBS+40%培養基+10%DMSO(現用現配)
3.加1.5凍存液在離心管中,將細胞吹打均勻,移入凍存管內.
放入-20度冰箱2-4小時后.再放入-80度冰箱過夜,第二天放入液氮罐保存
原則  慢凍速溶
4.加1.5凍存液在離心管中,將細胞吹打均勻,移入凍存管內。
凍存時間。放入4度冰箱10分鐘。再放入-20度冰箱30分鐘-1小時。不能超過1小時。zui后放入-80度冰箱過夜。第二天放入液氮中。

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