小鼠卵泡抑素(FS)ELISA試劑盒其他指標(biāo):SPC-A-1(肺腺癌) 可溶性凋亡相關(guān)因子配體(sFASL) 絲裂原激活的蛋白激酶/MAP激酶(MAPK)
HGC-27(胃癌(未分化)) 凋亡抑制因子(IAP) *(LZM)
LTEP-a-2(肺腺癌) 集落刺激因子(CSF) 黏著斑激酶(FAK)
AGS(胃腺癌) γ干擾素誘導(dǎo)單核因子(MIGF/CXCL9) 可溶性磷脂酶A2(sPL-A2)
MGC80-3(胃癌) 干擾素誘導(dǎo)T趨化因子(ITAC/CXCL11) 脫氧核糖核酸酶Ⅰ(DNase-Ⅰ)
95-D(高轉(zhuǎn)移肺癌) CD14分子(CDl4) *酶(Arg)
BGC-823(胃腺癌(低分化)) 凋亡誘導(dǎo)因子(AIF) *酶(Arg)
BT549(乳腺管癌) 白共同抗原(LCA/CD45) 中性粒堿性磷酸酶(NAP)
SGC-7901(胃腺癌) CD4分子(CD4) 間變性淋巴瘤激酶(ALK)
T-47D(乳腺管癌) P鈣黏蛋白/胎盤鈣黏蛋白(P-cad) 激動(dòng)異構(gòu)酶/分裂素MB(CKMB)
T-47D(乳腺管癌) 角化生長(zhǎng)因子(KGF) 肌球蛋白輕鏈激酶(MLCK)
TE-11(食管癌) 血小板衍生生長(zhǎng)因子BB(PDGF-BB) *硫轉(zhuǎn)移
小鼠卵泡抑素(FS)ELISA試劑盒 ELISA的應(yīng)用
ELISA法是免疫診斷中的一項(xiàng)新技術(shù),現(xiàn)已成功地應(yīng)用于多種病原微生物所引起的傳染病、寄生蟲病及非傳染病等方面的免疫診斷。也已應(yīng)用于大分子抗原和小分子抗原的定量測(cè)定,根據(jù)已經(jīng)使用的結(jié)果,認(rèn)為ELISA法具有靈敏、特異、簡(jiǎn)單、快速、穩(wěn)定及易于自動(dòng)化操作等特點(diǎn)。不僅適用于臨床標(biāo)本的檢查,而且由于一天之內(nèi)可以檢查幾百甚*千份標(biāo)本,因此,也適合于血清流行病學(xué)調(diào)查。本法不僅可以用來測(cè)定抗體,而且也可用于測(cè)定體液中的循環(huán)抗原,所以也是一種早期診斷的良好方法。因此ELISA法在生物醫(yī)學(xué)各領(lǐng)域的應(yīng)用范圍日益擴(kuò)大,
可概括四個(gè)方面:
1、免疫酶染色各種細(xì)胞內(nèi)成份的定位。
2、研究抗酶抗體的合成。
3、顯現(xiàn)微量的免疫沉淀反應(yīng)。
4、定量檢測(cè)體液中抗原或抗體成份。
試劑器材
試劑
?。?font face="Times New Roman">1) 包被緩沖液(PH9.60.05M碳酸鹽緩沖液):
Na2CO3 1.59克
NaHCO3 2.93克
加蒸餾水至1000ml
(2) 洗滌緩沖液(PH7.4PBS):0.15M
KH2PO4 0.2克
Na2HPO4·12H2O 2.9克
NaCl 8.0克
KCl 0.2克
Tween-20 0.05% 0.5ml
加蒸餾水至1000ml
(3) 稀釋液:
牛血清白蛋白(BSA) 0.1克
加洗滌緩沖液至100ml
或以羊血清、兔血清等血清與洗滌液配成5~10%使用。
?。?font face="Times New Roman">4) 終止液(2M H2SO4):
蒸餾水178.3ml,逐滴加入濃硫酸(98%)21.7ml。
?。?font face="Times New Roman">5) 底物緩沖液(PH5.0磷酸棗檸檬酸):
0.2MNa2HPO4(28.4克/L)25.7ml
0.1M檸檬酸(19.2克/L) 24.3ml
加蒸餾水50ml。
?。?font face="Times New Roman">6) TMB(四甲基聯(lián)苯胺)使用液:
TMB(10mg/5ml無水乙醇)0.5ml
底物緩沖液(PH5.5) 10ml
0.75%H2O2 32μl
?。?font face="Times New Roman">7) ABTS使用液:
ABTS 0.5mg
底物緩沖液(PH5.5) 1ml
3%H2O2 2μl
?。?font face="Times New Roman">8) 抗原、抗體和酶標(biāo)記抗體。
?。?font face="Times New Roman">9) 正常人血清和陽(yáng)性對(duì)照血清。
elisa試劑盒樣品收集,處理及保存方法
1、 血清:操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2、 血漿:EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測(cè)。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3、 細(xì)胞上清液:1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4、 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液。
5、 保存:如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測(cè)前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。